Daugavpilī teātris pastāv jau kopš XIX gadsimta vidus. Krievu dramatiskais teātris - pirmais krievu teātris Latvijā - nodibināts 1854. (citos avotos -1856.) gadā Dinaburgā. Šo teātri pēc privāta projekta nodibināja un uzturēja Daugavpils cietokšņa galvenais inženieris Nikolajs Hagelstroms. 1858. gadā teātris ar labiem panākumiem piedalījās viesizrādēs Rīgā.
Latviešu dramatiskais teātris - tika nodibināts 1921. gadā Daugavpilī, teātris atradās toreizējā Dzelzceļnieku ēkā. Teātra vadītāja bija aktrise un režisore Otīlija Muceniece. 1930. gadā teātri vadīja aktieris un režisors Jānis Kļava. 1938. gadā teātris saņēma jaunu zāli jaunatklātajā Vienības namā. Tajā laikā tā bija viena no modernākajām teātra zālēm Eiropā. Šajā gadā teātri savā aprūpē pārņēma pilsētas pašvaldība.
Pēc Otrā pasaules kara 1944. gadā darbu atsāka tikai Krievu drāmas teātris, jo lielākā daļa latviešu aktieru bija emigrācijā. Muzikāli dramatiskais teātris, kurā ietilpa latviešu, krievu trupas, orķestris, vokālisti, baletdejotāji, sāka veidoties 1958. (1959.) gadā. Teātra mākslinieciskais vadītājs bija Oļģerts Dunkers. 1962. gadā teātra darbības sākums tika pārtraukts, jo tas tika atzīts par nerentablu (lasi- neizdevīgu pastāvošajam padomju režīmam). No 1962. gada līdz 1988. gadam teātra telpām nebija pastāvīga saimnieka.
1988. gadā, Atmodai sākoties, ar Daugavpils pašvaldības un sabiedrības aktīvu atbalstu notika Daugavpils teātra atjaunošana. Par galveno režisoru tajā tika iecelts Nauris Klētnieks.
Lai veicinātu kultūras attīstību šajā reģionā, 1988. gada 30. jūnuijā tika pieņemts Ministru Padomes lēmums atjaunot Daugavpils muzikāli dramatisko teātri. Tika uzņemti divi aktieru kursi latviešu un krievu trupā, kuru pedagogi bija režisori Pēteris Krilovs, Anna Eižvertiņa u.c.
1996. gadā latviešu trupas aktieri pārgāja darbā uz Rīgas teātriem. 1996. gadā režisors Valentīns Maculevičs kļuva par Daugavpils teātra direktoru un strādāja ar krievu trupas aktieriem. 1999. gadā ar Daugavpils domes atbalstu Daugavpils Universitātē tika uzņemts jauns latviešu aktieru kurss, kuru no 2001. gada vadīja režisore Anna Eižvertiņa. 2003. gadā kurss ar diplomdarba izrādi - Šekspīra "Romeo un Džuljeta" (rež. A.Eižvertiņa) - beidza mācības un sāka darbu teātrī.
No 2001. gada Daugavpils teātri vada Inese Laizāne. Uz patstāvīgu darbu Daugavpils teātrī ienāk režisors Harijs Petrockis. 2001.gada balvu kā labākais aktieris saņem Daugavpils teātra aktieris Rūdolfs Plēpis (izrāde "Sapņu spēles jeb dvēseles kumēdiņi"). No 2002.gada Daugavpils teātrī ienāk jauns latviešu trupas sastāvs, no šī brīža teātrī pilnvērtīgā sastāvā ir gan krievu, gan latviešu trupas. 2002.gadā tiek iestudēta pirmā rokopera "Čigāns sapnī", M.Čaklā librets un J.Kulakova mūzika.
Teātrī bieži tiek uzņemti viesmākslinieki no citiem teātriem, kas piedalās jaunu izrāžu tapšanā (J.Lisners, E. Melbārdis, J.Paukštello u.c.), teātra mūziku mums raksta V.Zilveris, R.Pauls, J.Kulakovs. Arī mūsu pašu "Laimas muzykanti" A.Uškāna vadībā aktīvi piedalās izrāžu tapšanā.
Daugavpils teātrī izrādes iestudē daudzi viesrežisori - Mihails Mamedovs (Maskava), Semjons Losevs (Maskava), Fēliks Deičs (Valmiera), Ivars Lūsis (Liepāja), Anna Eižvertiņa (Rīga), Diāna Ramanoviča (Rīga), Aleksejs Isakovs (Sankt-Pēterburga), Egidins Mažintas (Lietuva), Reimons Godfruā (Francija), Jakovs Rafalsons (Rīga), Jānis Kaijaks (Riga), Arnis Ozols (Rīga) u.c.
Teātris tiek aicināts uz daudziem festivāliem, bijis viesizrādēs ASV, Krievijā, Ukrainā, Igaunijā, Lietuvā, Ēģiptē, Beļģijā, Vācijā u.c. Ik mēnesi teātris dodas viesizrādēs pa Latviju.
